直接口服抗凝药的实验室间变异性

介绍

直接口服抗凝剂（DOAC）已获许可以固定剂量使用，无需实验室测试进行调整1。然而，人们越来越认识到，实验室测试是在特殊情况下需要2 - 5。已经开发出专门的测试方法，例如稀释凝血酶时间（dTT），Ecarin凝结（或生色）和抗活化的X因子测定法，以测定达比加群或利伐沙班和阿哌沙班的抗凝作用。对一些这些测试和DOAC可能对凝血试验影响的业绩报告已经公布6 - 8，但尚无来自外部质量控制计划中评估的DOAC浓度在实验室间变异性的数据。意大利血栓形成中心联合会一直对国际标准化比率（INR）9进行能力验证的传统。在过去的一年中，我们通过组织和进行能力调查以评估DOAC浓度测量中的实验室间差异来扩展该计划。

设计

在2016-2017年间组织并进行了两次调查。在第一个专用于达比加群的血浆中，包括了三种冻干血浆（维尔芬，奥兰治堡，纽约州，美国）：一个不含达比加群，而另外两个则包含中低浓度的纯化药物。第二个专门针对达比加群，利伐沙班和阿哌沙班，包括一种不含DOAC的血浆，其他血浆中补充了达比加群，利伐沙班或阿哌沙班（Werfen）。参与者不知道熟练血浆中的DOAC组成/浓度，要求参与者测量凝血酶原时间（PT），活化的部分凝血活酶时间（APTT）和凝血酶时间（TT），并测量这三种药物的浓度进行专门的测试。要求参与者根据制造商的说明使用本地方法进行测试和校准。使用基于Web的系统将结果发送到组织中心（米兰）。它们表示为PT，APTT和TT的凝血时间比率（患者/正常）和浓度（ng毫升）-1）每个DOAC。该分析包括在排除异常值10之后，每种方法中的总平均（共识）值和变异系数（CV）的计算，与所使用的试剂无关。还计算了报告无DOAC血浆的每个DOAC浓度＜30 ng mL –1的参与者所占的百分比。

结果与讨论

调查一

PT

不含达比加群的血浆的平均PT比为1.04，低水平（即42 ng mL -1）的血浆的平均PT比为1.05，中等水平（即182 ng mL -1）的血浆的平均PT比为1.23 。实验室间CV <4.4％（表1；图1）。

表1. 在测量没有（血浆C）或含有（血浆E和D）达比加群的普通冻干血浆时，参与者观察到的凝血和实验室间变异的参数（调查I）

	PT比			APTT比率			TT比			浓度（ng mL -1）
	C	Ë	d	C	Ë	d	C	Ë	d	C	Ë	d
参加人数	235	234	235	217	216	217	81	71	28岁	58	78	79
均值*	1.04	1.05	1.23	0.99	1.30	1.87	0.99	7.6	15.4	0.20	42	182
简历*	3.8	3.8	4.4	7.3	9.1	9.2	12	37	65岁	–	13.9	9.6
％†		–	–	–	–	–	–	–	–	95	–	–

• APTT，激活部分凝血活酶时间；CV，变异系数；PT，凝血酶原时间；TT，凝血酶时间。*均值和CV值是在排除异常值10之后计算的。†报告血浆C（不含药物）的达比加群浓度<30 ng mL -1的参与者百分比。

 

APTT

不含达比加群的血浆的平均APTT比率为0.99，低水平（即42 ng mL -1）的血浆的平均APTT比率为1.30，中等水平（即182 ng mL -1）的血浆的平均APTT比率为1.87 。实验室间CV <9.2％。

TT

对于不含达比加群的血浆，平均TT比为0.99，对于低水平（即42 ng mL -1）的血浆，平均TT比为7.6，对于中等水平（即182 ng mL -1）的血浆，平均TT比为15.4 。实验室间的简历率为12–65％。

达比加群浓度

达比加群测量所使用的方法包括来自不同制造商的dTT（有关更多详细信息，请参见图例，其中报告了使用相同方法的参与者组）。参与者估计的不含达比加群的血浆中达比加群的平均浓度为0.20 ng mL -1，其值范围较大（从0 ng mL -1到43 ng mL -1）。95％的参与者报告浓度<30 ng mL -1；报告的结果中有18％对应于0 ng mL -1；18％的人报告说其浓度小于其方法的定量极限。为参与者计算的平均值（n= 5）在测试不含达比加群的血浆时，使用西门子公司的BC凝血酶试剂与包含相对低浓度达比加群的血浆的同一组受试者的平均值几乎没有区别（图1）。低和中等水平血浆的达比加群平均浓度分别为42 ng mL -1和182 ng mL -1。实验室间CV <13.9％。